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技術中�

兔集落刺激因子1受體(CSF1R)ELISA檢測試劑�

2017�01�18� 10:29:23人氣�211來源�江萊生物-中國老牌試劑供應�

資料類型doc文件資料大小68811
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� � �江萊生物-中國老牌試劑供應� 需要積�0
� � �兔集落刺激因子1受體(CSF1R)ELISA檢測試劑�
【資料簡介�

本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷�

 

兔集落刺激因子1受體(CSF1R)ELISA檢測試劑�使用說明�

 

兔集落刺激因子1受體(CSF1R)ELISA檢測試劑� 試劑盒名稱�

兔集落刺激因子1受體(CSF1R)ELISA檢測試劑�

 試劑盒用途�

定量血�、血漿及相關液體樣本�集落刺激因子1受體(CSF1R�的含�

檢測原理�

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被集落刺激因子1受體(CSF1R�透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中集落刺激因子1受體(CSF1R�濃度呈正相關�450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本�集落刺激因子1受體(CSF1R�含量�

 試劑�組成�

1

 

酶標包被�

12�×8�

7

底物夜A

6mL

2

 

標準品:200ng/ml

0.6mL

8

底物夜B

6mL

3

 

20倍濃縮洗滌液

20mL

9

終止�

6mL

4

 

標準品稀釋液

6mL

10

說明�

1�

5

 

*

6mL

11

封板�

1�

6

 

酶標試劑

6mL

12

密封�

1�

備注�標準品用標準品稀釋液依次稀釋為�200�100�50�25�12.5�6.25ng/ml

 

需要而未提供的試劑和器材�

1�37℃恒溫箱

  • 標準規格酶標儀
  • 精密移液器及一次性吸�
  • 蒸餾�
  • 一次性試�
  • 吸水�

操作步驟�

1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平�30分鐘�

2、配液:用蒸餾水�20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液�

3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準�50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再�*40μL(即樣本稀�5倍);空白對照孔不加�

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min�

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)�

6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作�50μL,空白對照孔不加�

7、溫育:重復4的操作�

8、洗板:重復5的操作�

9、顯色:每孔先加入顯色劑A �50μL,再加入顯色劑B� 50μL�37℃避光顯�15min�

10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)�

11、測定:以空白孔調零,在終止�15分鐘內,�450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)�

12、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數�

 樣本要求�

1、樣�不能含疊氮鈉(NaN3,因�疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑�

2�標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融�

3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒�

注意事項�

1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準�

2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存�

3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差�

4、牢記樣本已經稀�5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度�

5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果�0.1-200ng/ml范圍內),乘以總稀釋倍數即為樣本zui終濃度�

6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間�

7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液�*和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜�

8、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用�

9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下�

 

操作程序總結�

準備試劑,樣品和標準� 

 

加入準備好的樣品和標準品�37℃反�30分鐘

 

洗板4次,加入酶標試劑�37℃反�30分鐘

 

洗板4次,加入顯色液A、B�37℃顯�15分鐘

 

加入終止�

 

15分鐘之內讀OD�

 

計算

 

檢測范圍�

咨詢�

規格�

咨詢�

貯藏�

咨詢�

有效期�

咨詢�

江萊生物-中國老牌試劑供應�作�

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