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技術中�

免費代測�*VIII相關抗原ELISA檢測試劑�

2014�01�15� 09:22:38人氣�379來源�上海酶聯生物研究所

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� � �上海酶聯生物研究所 需要積�0
� � �ELISA檢測試劑�
【資料簡介�

本試劑僅供研究使�  標本:血清或血�

 

試驗原理�

FVIII-Ag試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA�.已知FVIII-Ag濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將FVIII-Ag�*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物�ELISA檢測試劑�然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中FVIII-Ag的濃度呈比例關系�

自備材料

蒸餾水�
加樣器:5ul�10ul�50ul�100ul�200�500ul�1000ul�
振蕩器及磁力攪拌器等�

 

安全�

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗�
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品�
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份�

 

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存�
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質�
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用�
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器�
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品�
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水�
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值�
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣�
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作�

 

樣品收集、處理及保存方法

血�-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后�1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離�
血�-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測�1000×g離心30分鐘去除顆粒�
細胞上清�---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物�
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�

 

試劑的準�

標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備�ELISA檢測試劑�不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻�

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾�50倍稀釋�

 

操作步驟

使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差�
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔�
加入稀釋好后的標準�50ul于反應孔、加入待測樣�50ul于反應孔內。立即加�50ul�*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻�37℃溫�1小時�
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次�
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫�30分鐘�
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次�
每孔加入底物A、B�50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫�10分鐘。避免光照�
取出酶標板,迅速加�50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果�
�450nm波長處測定各孔的OD值�

 

局�

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果�

 

試劑盒性能

1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990�

2. 特異性:不與人其它細胞因子反應�

3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%�

 

� � � � � � �

1、儀器值:于波�450nm的酶標儀上讀取各孔的OD�

 

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的FVIII-Ag標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的FVIII-Ag含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度�

 

3、檢測值范圍:0-8.0nmol/L

 

4、敏感度� 0.01 nmol/L

堿式沒食子酸鉍標準品 Bismuth Subgallate (AS) Y38957 2g 99-26-3
*混合物R標準� Y38958 10mg 992-62-1
*相關物質N標準� Y38959 50mg 992-62-1
*標準� Pyrazinamide  Y38960 200mg 98-96-4 
(-)-表沒食子兒茶素沒食子酸酯標準� Y38961 20mg 989-51-5
*標準� Niacinamide (Vitamin B3) Y38962 500mg 98-92-0 
異丙苯標準品 Cumene Y38963 1.2ml×3ampules 98-82-8
甲酚曲唑三硅氧烷相關物質B標準� Y38964 25mg 98809-58-6
醋酸*標準� Betamethasone Acetate Y38965 500mg 987-24-6
阿散酸標準品 Arsanilic Acid Y38966 25mg 98-50-0
*標準� Metoprolol ELISA檢測試劑�Succinate  Y38967 200mg 98418-47-4 
*標準� Finasteride  Y38968 200mg 98319-26-7 
*標準� Brompheniramine Maleate Y38969 125mg 980-71-2

上海酶聯生物研究所作�

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