血細(xì)胞檢驗(yàn)是指對(duì)血液中白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血小板（PLT）、血紅蛋白（HGB）及相關(guān)數(shù)據(jù)的計(jì)數(shù)檢測分析，也稱血常規(guī)檢驗(yàn)。血常規(guī)檢驗(yàn)不僅是診斷各種血液病的主要依據(jù)，而且對(duì)其它系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可提供許多重要信息，是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中zui常用、zui重要的基本內(nèi)容之一。血常規(guī)檢驗(yàn)的zui原始的手段是通過顯微鏡人工鏡檢，隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，高科學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，*已成為取代鏡檢進(jìn)行血常規(guī)分析的重要手段，尤其是帶分類的*。

　　無論是鏡檢、還是使用*，要獲得血常規(guī)檢驗(yàn)的穩(wěn)定可靠、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，防止臨床診療人出錯(cuò)誤的判斷，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)要充分考慮影響血常規(guī)檢驗(yàn)中的多種影響因素，并嚴(yán)格加以控制：

　　一、標(biāo)本的采集

　　為了取得準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量檢驗(yàn)的*步。保證血液標(biāo)本中各項(xiàng)細(xì)胞的完整形態(tài)是作為血常規(guī)檢驗(yàn)用的高質(zhì)量的標(biāo)本的zui基本的要求。血液細(xì)胞檢驗(yàn)標(biāo)本的制備分為采集和抗凝2個(gè)步驟。

　　1.標(biāo)本的采集

　　按采血部位的不同，取得血常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本，zui常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細(xì)血管采血。各類文獻(xiàn)均表明，靜脈血血樣是zui可靠的標(biāo)本，手指血是末梢毛細(xì)血管血樣中與靜脈血差異zui小且較為穩(wěn)定的血樣。有研究表明，與靜脈血相比，手指血的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性仍然較差：白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高（+8%）而血小板計(jì)數(shù)明顯低（-9%）。因此，絕大多數(shù)專家建議：血常規(guī)檢驗(yàn)特別是應(yīng)用*時(shí)，應(yīng)使用靜脈血。

　　2.標(biāo)本的抗凝

　　用于血常規(guī)檢驗(yàn)的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理，在目前的眾多抗凝劑中，EDTA鹽（EDTA-Na2，EDTA-K2，EDTA-K3）是對(duì)白細(xì)胞形態(tài)和血小板影響相對(duì)較小的抗凝劑，用于血常規(guī)檢驗(yàn)。除采血因素的影響（生理性因素、采血部位等）外，多數(shù)情況下，血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時(shí)，由于抗凝劑相對(duì)不足，血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加，在用于*時(shí)，微凝血塊可能阻塞儀器，同時(shí)影響一些檢驗(yàn)指標(biāo)。血液比例過低，抗凝劑相對(duì)過剩，對(duì)檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)造成嚴(yán)重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后，白細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變，這種改變和時(shí)間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的*濃度（與血液比）為1.5mg/ml，如果血樣少，EDTA的濃度達(dá)到2.5mg/ml，中性粒細(xì)胞腫脹、分葉消失，血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片，這些改變都會(huì)使血常規(guī)檢驗(yàn)和血細(xì)胞計(jì)數(shù)得出錯(cuò)誤結(jié)果。這一點(diǎn)在用自動(dòng)*時(shí)尤為重要。

　　靜脈血和末梢血均可經(jīng)抗凝劑抗凝成全血標(biāo)本（標(biāo)本中不含稀釋液，或?qū)?biāo)本造成的稀釋的影響極小），顯而易見，末梢血抗凝標(biāo)本要達(dá)到合適的血液和抗凝劑的比例是非常困難的。因此，多數(shù)專家建議，在制備全血比例是非常困難的。因此，多數(shù)專家建議，在制備全血標(biāo)本時(shí)，應(yīng)使用定量的含EDTA鹽的真空*采集靜脈血。

　　無論鏡檢，或是使用*，由于絕大多數(shù)的對(duì)標(biāo)本稀釋的稀釋液中含有抗凝劑，在一定量的稀釋液中可直接加入微量靜脈血或末梢血液（10-40μl）即可制備成通常所說的預(yù)稀釋標(biāo)本。多數(shù)情況下，預(yù)稀釋標(biāo)本的制備適用于末梢血的血樣。

　　二、標(biāo)本的稀釋

　　血液是由血細(xì)胞和血漿兩部分組成的紅色粘稠混懸液。在進(jìn)行血細(xì)胞檢驗(yàn)計(jì)數(shù)時(shí)，直接用血液計(jì)數(shù)是困難的，無論是鏡檢還是用*，血液均需合適準(zhǔn)確的稀釋后才能進(jìn)行血細(xì)胞的檢驗(yàn)計(jì)數(shù)。基于*的基本原理，在*的設(shè)計(jì)應(yīng)用中，稀釋倍數(shù)和計(jì)數(shù)容量是zui重要的設(shè)計(jì)指標(biāo)之一。

　　自50年代初，美國庫爾特研制了電阻法（小孔原理）*以來，血細(xì)胞的稀釋液為介質(zhì)的流動(dòng)的形式通過傳感器測量計(jì)數(shù)（如圖-1），血細(xì)胞通過傳感器時(shí)一定需要排隊(duì)通過，否則可能就會(huì)造成重合損失（如圖-2）。

　　實(shí)際應(yīng)用時(shí)，是將血液稀釋于稀釋液中形成稀釋標(biāo)本（稀釋比為1：N），以流動(dòng)檢測的方式測出一定量（V）的稀釋標(biāo)本內(nèi)的血細(xì)胞數(shù)（T），經(jīng)換算后得出血液中的細(xì)胞濃度（L）：L-T×N/V.

　　由此可見，準(zhǔn)確合理的稀釋倍數(shù)（在用于儀器時(shí)，RBC、PLT的稀釋倍數(shù)一般為1：10000至1：3000；WBC、HGB的稀釋倍數(shù)一般為1：250左右）和準(zhǔn)確、穩(wěn)定的測量容量是血細(xì)胞檢測的又一重要基礎(chǔ)。稀釋倍數(shù)過低，會(huì)形成細(xì)胞排隊(duì)通過傳感器的重合缺損；稀釋倍數(shù)過大，則會(huì)造成一定測量容量內(nèi)血細(xì)胞的數(shù)量過少，這都會(huì)嚴(yán)重影響血液細(xì)胞檢驗(yàn)的測量精度。

　　三、標(biāo)本的儲(chǔ)存

　　如前文所述，抗凝劑因時(shí)間和濃度的不同，會(huì)造成對(duì)血細(xì)胞形態(tài)的影響。有研究表明，用EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本，在標(biāo)本收集后的5分鐘內(nèi)或30分鐘后，8小時(shí)內(nèi)（室溫）檢測，可以得到*的檢測結(jié)果。如果不需要血小板和白細(xì)胞分類的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，則標(biāo)本可以在2℃-8℃的條件下存入至24小時(shí)。

　　預(yù)稀釋標(biāo)本一般需要在標(biāo)本制備后10分鐘內(nèi)予以測量；如果稀釋液中添加細(xì)胞穩(wěn)定劑，預(yù)稀釋標(biāo)本的存放時(shí)間也不可超過4小時(shí)。

　　總之，影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多，要想取得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，就要在實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)步驟中都嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。本文所講述的內(nèi)容，僅僅是對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)中注意事項(xiàng)的部分總結(jié)，可能存在的不足和缺陷，還是請(qǐng)常年處于臨檢一線工作中的老師們批評(píng)、指正。