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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)定步驟
2021-8-26 閱讀(700)
α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)定步驟:
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測(cè)定
(1)在試劑五中加入 18mL 試劑四充分溶解,置于 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)
水浴 10min;現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)在試劑六中加入 1mL 蒸餾水,充分溶解待用;現(xiàn)配現(xiàn)用;
(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、10μL 試劑六和 180μL 試劑五,混
勻,立即記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 2min20s 后的吸光值 A2,計(jì)算 ΔA=A2-A1。
測(cè)定原理
α-KGDH 催化 α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶 A 生成琥珀酰輔酶 A、二氧化碳和 NADH,NADH
在 340 nm 有特征吸收峰,以 NADH 的生成速率表示 α-KGDH 活性。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、
研缽、冰和蒸餾水。
磷酸化動(dòng)力相關(guān)蛋白1抗體
DNA連接酶4抗體
二肽基肽酶6抗體
二氫還原酶抗體
有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體
有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體
DOM3Z蛋白抗體
蓬亂蛋白2抗體
磷酸化蓬亂蛋白2抗體
轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體
脫氫酶/還原酶家族成員2抗體
牙本質(zhì)磷蛋白抗體
Dermokine β蛋白抗體
DPCR1蛋白抗體
表皮乳頭源性蛋白6抗體
雙特異性蛋白磷酸酶7抗體
雙特異性蛋白磷酸酶26抗體
阿米洛利結(jié)合蛋白1抗體
S期激酶活化蛋白DBF4A抗體
著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體
雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體
神經(jīng)干細(xì)胞樹突調(diào)節(jié)蛋白DAGLα抗體
對(duì)接蛋白4抗體
DULLARD蛋白抗體
/蛋白激酶MNB抗體
無胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體
朊蛋白DPL抗體
肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良蛋白激酶抗體
有絲分裂控制蛋白dis3抗體