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技�(shù)中心

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�

2016�08�03� 09:40:37人氣�105�(lái)源:上海星科生物科技有限公司

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�(guān) � �小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�
【資料簡(jiǎn)介�

本試劑盒只能用于科學(xué)研究不得用于�(yī)�(xué)診斷

 

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�使用�(shuō)明書

 

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑� 試劑盒名稱�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑� 試劑盒用途�

量小�血清、血漿及相關(guān)液體樣本�嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)的含�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�檢測(cè)原理�

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶�(lián)免疫吸附法(ELISA)。將�(biāo)�(zhǔn)品、待�(cè)樣本加入到預(yù)先包�嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未�(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠�(shí)間后,洗滌除去未�(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根�(guò)氧化物酶(HRP)催化下�(zhuǎn)化為�(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)濃度呈正相關(guān)�450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)�(biāo)�(zhǔn)品和樣品的OD值,�(jì)算樣本中嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)含量�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑� 試劑�組成�

1

 

酶標(biāo)包被�

12×8

7

底物夜A

6mL

2

 

�(biāo)�(zhǔn)�200ng/ml

0.6mL

8

底物夜B

6mL

3

 

20倍濃縮洗滌液

20mL

9

終止�

6mL

4

 

�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液

6mL

10

�(shuō)明書

1

5

 

稀釋液

6mL

11

封板�

1

6

 

酶標(biāo)試劑

6mL

12

密封�

1�(gè)

備注��(biāo)�(zhǔn)�用標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為�200�100�50�25�12.5�6.25ng/ml

 

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�需要而未提供的試劑和器材

137恒溫�

  • �(biāo)�(zhǔn)�(guī)格酶�(biāo)儀
  • 精密移液器及一次性吸�
  • 蒸餾�
  • 一次性試�
  • 吸水�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�操作步驟�

1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平�30分鐘�

2、配液:用蒸餾水�20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液�

3、加�(biāo)�(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠�(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上�分別�(shè)置標(biāo)�(zhǔn)品孔�待測(cè)�和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)�(zhǔn)品孔中加入標(biāo)�(zhǔn)�50μL;待�(cè)樣本孔中先加入待�(cè)樣本10μL,再�*40μL(即樣本稀�5倍);空白對(duì)照孔不加�

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min�

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍,每孔加滿洗滌液,靜�1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書操作洗板)�

6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作�50μL,空白對(duì)照孔不加�

7、溫育:重復(fù)4的操作�

8、洗板:重復(fù)5的操作�

9、顯色:每孔先加入顯色劑A �50μL,再加入顯色劑B� 50μL�37℃避光顯�15min�

10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終��50μL,終止反�(yīng)(顏色由�(lán)色立�(zhuǎn)黃色�

11、測(cè)定:以空白孔�(diào)零,在終止后15分鐘�(nèi),用450nm波長(zhǎng)�(cè)量各孔的吸光�(OD值)

12、計(jì)算:根據(jù)�(biāo)�(zhǔn)品的濃度及對(duì)�(yīng)的OD值,�(jì)算出�(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根�(jù)OD回歸方程�(jì)算出�(duì)�(yīng)�樣品濃度也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)�(jì)算�zui終濃度為�(shí)��(cè)�濃度乘以稀釋倍數(shù)

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑� 樣本要求�

1、樣�不能含疊氮鈉(NaN3,因?yàn)?/span>疊氮鈉(NaN3)是辣根�(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑�

2��(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取,提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行,提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放�-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�注意事項(xiàng)�

1、實(shí)�(yàn)�(yán)格按照說(shuō)明書的操作�(jìn)行,�(shí)�(yàn)�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn)�

2�酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存�

3�建議所��(biāo)�(zhǔn)品、樣�和空白對(duì)�都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)�(yàn)誤差

4、牢記樣本已�(jīng)稀�5倍,�(jì)算結(jié)果乘�5才是樣本�(shí)際濃度�

5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超�(guò)�范圍,為�(biāo)�(zhǔn)曲線延伸�(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,�(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后�(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍�(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度�

6、若顯色�(guò)淺,可適�(dāng)延長(zhǎng)底物溫育�(shí)間�

7�免交叉污染,�(biāo)�(zhǔn)品、樣本和空白�(duì)照每加一�(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液�*和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微�;不�重復(fù)使用封板�

8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批�(hào)的試劑不得混用�

9、底物B�(duì)光敏感,避免�(zhǎng)�(shí)間暴露于光下�

 

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�操作程序總結(jié)�

�(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)�(zhǔn)� 

 

加入�(zhǔn)備好的樣品和�(biāo)�(zhǔn)品,37℃反�(yīng)30分鐘

 

洗板4次,加入酶標(biāo)試劑�37℃反�(yīng)30分鐘

 

洗板4次,加入顯色液A、B�37℃顯�15分鐘

 

加入終止�

 

15分鐘之內(nèi)讀OD

 

�(jì)�

 

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�檢測(cè)范圍

0.1-200ng/ml

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑��(guī)格�

96T/�48T/�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�貯藏�

2-8℃,避光防潮保存�

小鼠嗜酸性粒�(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑�有效期�

6�(gè)�

 

上海星科生物科技有限公司作�

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