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技�(shù)中心

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�

2016�07�04� 08:14:54人氣�77來源�上海星科生物科技有限公司

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� � �上海星科生物科技有限公司 需要積�0
�(guān) � �小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�
【資料簡介�

本試劑盒只能用于科學(xué)研究不得用于�(yī)�(xué)診斷

 

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�使用說明�

 

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑� 試劑盒名稱�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑� 試劑盒用途�

量豚�血清、血漿及相關(guān)液體樣本�α干擾�(IFNα)的含�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�檢測原理�

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶�(lián)免疫吸附法(ELISA)。將�(biāo)�(zhǔn)品、待測樣本加入到�(yù)先包�α干擾�(IFNα)透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未�(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下�(zhuǎn)化為�(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中α干擾�(IFNα)濃度呈正相關(guān)�450nm波長下測定OD值,根據(jù)�(biāo)�(zhǔn)品和樣品的OD值,計算樣本�α干擾�(IFNα)含量�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑� 試劑�組成�

1

 

酶標(biāo)包被�

12×8

7

底物夜A

6mL

2

 

�(biāo)�(zhǔn)�200ng/ml

0.6mL

8

底物夜B

6mL

3

 

20倍濃縮洗滌液

20mL

9

終止�

6mL

4

 

�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液

6mL

10

說明�

1

5

 

稀釋液

6mL

11

封板�

1

6

 

酶標(biāo)試劑

6mL

12

密封�

1

備注��(biāo)�(zhǔn)�用標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為�200�100�50�25�12.5�6.25ng/ml

 

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�需要而未提供的試劑和器材

137恒溫�

  • �(biāo)�(zhǔn)�(guī)格酶�(biāo)儀
  • 精密移液器及一次性吸�
  • 蒸餾�
  • 一次性試�
  • 吸水�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�操作步驟�

1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平�30分鐘�

2、配液:用蒸餾水�20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液�

3、加�(biāo)�(zhǔn)品和待測樣本:取足夠�(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上�分別�(shè)置標(biāo)�(zhǔn)品孔�待測�和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)�(zhǔn)品孔中加入標(biāo)�(zhǔn)�50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再�*40μL(即樣本稀�5倍);空白對照孔不加�

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min�

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍,每孔加滿洗滌液,靜�1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)�

6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作�50μL,空白對照孔不加�

7、溫育:重復(fù)4的操作�

8、洗板:重復(fù)5的操作�

9、顯色:每孔先加入顯色劑A �50μL,再加入顯色劑B� 50μL�37℃避光顯�15min�

10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終��50μL,終止反�(yīng)(顏色由�(lán)色立�(zhuǎn)黃色�

11、測定:以空白孔�(diào)零,在終止后15分鐘�(nèi),用450nm波長測量各孔�吸光�(OD值)

12、計算:根據(jù)�(biāo)�(zhǔn)品的濃度及對�(yīng)的OD值,計算出標(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根�(jù)OD回歸方程計算�對應(yīng)�樣品濃度也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算�zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑� 樣本要求�

1、樣�不能含疊氮鈉(NaN3,因�疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑�

2��(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取,提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行,提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放�-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�注意事項�

1、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作�(jìn)行,實驗�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn)�

2�酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存�

3�建議所��(biāo)�(zhǔn)品、樣�和空白對�都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤�

4、牢記樣本已�(jīng)稀�5倍,計算�(jié)果乘�5才是樣本實際濃度�

5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為�(biāo)�(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定�(zhǔn)確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍�(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度�

6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間�

7�免交叉污染,�(biāo)�(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液�*和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微�;不�重復(fù)使用封板�

8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用�

9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下�

 

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�操作程序總結(jié)�

�(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)�(zhǔn)� 

 

加入�(zhǔn)備好的樣品和�(biāo)�(zhǔn)品,37℃反�(yīng)30分鐘

 

洗板4次,加入酶標(biāo)試劑�37℃反�(yīng)30分鐘

 

洗板4次,加入顯色液A、B�37℃顯�15分鐘

 

加入終止�

 

15分鐘之內(nèi)讀OD

 

計算

 

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�檢測范圍

0.1-200ng/ml

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑��(guī)格�

96T/�48T/�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�貯藏�

2-8℃,避光防潮保存�

小鼠B�(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑�有效期�

6個月

 

上海星科生物科技有限公司作�

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