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技術中�

魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯免疫分析試劑盒使用說明�

2015�11�27� 09:45:51人氣�222來源�上海研域儀器設備有限公�

資料類型doc文件資料大小157696
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� � �上海研域儀器設備有限公� 需要積�0
� � �魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯免疫分析試劑盒使用說明�
【資料簡介�

�γ干擾�(IFN-γ)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用�
檢測范圍�
96T
3ng/L - 90ng/L
使用目的�
本試劑盒用于測定魚血�、血漿及相關液體樣本�γ干擾�(IFN-γ)含量�
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中魚γ干擾�(IFN-γ)水平。用純化的魚γ干擾�(IFN-γ)抗體包被微孔�,制成固相抗�,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾�(IFN-γ),再� HRP標記�γ干擾�(IFN-γ)抗體結合,形成抗�-抗原-酶標抗體復合�,經�*洗滌后加底物 TB顯色。TB�   HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中�γ干擾�(IFN-γ)呈正相關。用酶標儀� 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中魚γ干擾�(IFN-γ)濃度�
試劑盒組�
30倍濃縮洗滌液
20ml×1�
6ml×1�
12�×8�
6ml×1�
6ml×1�
6ml×1/�
終止�
6ml×1�
0.5ml×1�
1.5ml×1�
1�
2   酶標試劑
標準品(160 ng/L�
標準品稀釋液
3   酶標包被�
4   樣品稀釋液
5   顯色� A�
6   顯色� B�
10   說明�
11   封板�
12   密封�
2�
1�
標本要求�γ干擾�(IFN-γ)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保�,但應避免反復凍�
2.不能檢測含NaN3的樣�,因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活��
操作步驟
1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀��
80ng/L
40ng/L
20ng/L
10ng/L
5ng/L
5號標準品
4號標準品
3號標準品
2號標準品
1號標準品
150µl的原倍標準品加入  150µl標準品稀釋液
150µl�  5號標準品加入  150µl標準品稀釋液
150µl�  4號標準品加入  150µl標準品稀釋液
150µl�  3號標準品加入  150µl標準品稀釋液
150µl�  2號標準品加入  150µl標準品稀釋液
2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔待測樣品�。在酶標包被板上標準品準確加� 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl�然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度� 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混��

溫育:用封板膜封板后� 37℃溫�30分鐘�
配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30秒后棄去,如此重� 5�,拍��
加酶:每孔加入酶標試� 50µl,空白孔除外�
溫育:操作同 3�
洗滌:操作同 5�
顯色:每孔先加入顯色� A50µl,再加入顯色� B50µl,輕輕震蕩混��37℃避光顯�15分鐘.
10.終止:每孔加終止�    50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色��
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行�
操作程序總結�
計算以標準物的濃度為橫坐�� OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃�;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品� OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數�即為樣品的實際濃度�

注意事項�γ干擾�(IFN-γ)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使�,酶標包被板開封后如未用�,板條應裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有結晶析�,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確�,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘�,如標本數量多,*使用排槍加樣�
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值大于標準品�*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數�×n×5��
5.封板膜只限一次性使�,以避免交叉污染�
6.底物請避光保存�
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.
8.所有樣�,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準�
保存條件及有效期
1.試劑盒保存��2-8℃�
2.有效期�6個月

上海研域儀器設備有限公�作�

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