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新品人α顆粒膜蛋白140ELISA檢測試劑盒說明書

2015�02�06� 09:28:38人氣�162來源�紀(jì)寧(上海)科研試劑經(jīng)銷商

資料類型doc文件資料大小19456
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� � �紀(jì)寧(上海)科研試劑經(jīng)銷商 需要積�0
�(guān) � �人α顆粒膜蛋白140ELISA檢測試劑�,新品人α顆粒膜蛋白140ELISA檢測試劑盒說明書價格,�
【資料簡介�

人α顆粒膜蛋白140ELISA檢測試劑�試驗(yàn)原理�
    GMP-140試劑盒是固相夾心法酶�(lián)免疫吸附�(shí)�(yàn)(ELISA�.已知GMP-140濃度的標(biāo)�(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)�(jìn)行檢測。先將GMP-140�*�(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素�(biāo)記過的HRP。再�(jīng)過溫育和洗滌,去除未�(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中GMP-140的濃度呈比例�(guān)系�

操作注意事項
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)�(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存�
2.實(shí)�(yàn)中不用的板條�(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)�
3.不用的其它試劑�(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保�(zhì)前使用�
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器�
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品�
6.洗滌酶�(biāo)板時�(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶�(biāo)反應(yīng)孔中吸水�
7.底物A�(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)�(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值�
8.加入試劑的順序�(yīng)一致,以保證所有反�(yīng)板孔溫育的時間一樣�
9.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序�(jìn)行溫育操作�

人α顆粒膜蛋白140ELISA檢測試劑�樣品收集、處理及保存方法
1、血�-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和�(nèi)毒素的試管。收集血液后�1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離�
2、血�-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測�1000×g離心30分鐘去除顆粒�
3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物�
4、組織勻�-----將組織加入適量生理鹽水搗碎�1000×g離心10分鐘,取上清�
5、保�------如果樣品不立即使用,�(yīng)將其分成小部�-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�


操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體�(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,�(chǎn)生加樣上的誤差�
2.根�(jù)待測樣品�(shù)量加上標(biāo)�(zhǔn)品的�(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)�(zhǔn)品和空白孔建議做�(fù)孔。每個樣品根�(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用�(biāo)本稀釋液1�1稀釋后加入50ul于反�(yīng)孔內(nèi)�
3.加入稀釋好后的�(biāo)�(zhǔn)�50ul于反�(yīng)孔、加入待測樣�50ul于反�(yīng)孔內(nèi)。立即加�50ul�*�(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻�37℃溫�1小時�
4.甩去孔�(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重�(fù)此操�3次。如果用洗板�(jī)洗滌,洗滌次�(shù)增加一次�
5.每孔加�80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫�30分鐘�
6.甩去孔�(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重�(fù)此操�3次。如果用洗板�(jī)洗滌,洗滌次�(shù)增加一次�
7.每孔加入底物A、B�50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫�10分鐘。避免光照�
8.取出酶�(biāo)板,迅速加�50ul終止液,加入終止液后�(yīng)立即測定�(jié)果�
9.在450nm波長處測定各孔的OD值�


人α顆粒膜蛋白140ELISA檢測試劑�性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)�(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與�(yù)期濃度相�(guān)系數(shù)R值為0.990�
2. 特異性:不與其它�(xì)胞因子反�(yīng)�
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系�(shù)均小�10%�

�(jié) � � � � � �
1、儀器值:于波�450nm的酶�(biāo)儀上讀取各孔的OD�

2、以吸光度OD值為縱坐�(biāo)(Y),相應(yīng)的GMP-140�(biāo)�(zhǔn)品濃度為橫坐�(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的GMP-140含量可根�(jù)其OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線換算出相�(yīng)的濃度�

3、檢測值范圍:0-400ng/ml

4、敏感度� 1.0 ng/ml

紀(jì)寧(上海)科研試劑經(jīng)銷商作�

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