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技術中�

48T基質金屬蛋白酶9人ELISA試劑盒說明書

2013�11�29� 06:27:59人氣�442來源�上海通蔚生物科技有限公司

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� � �上海通蔚生物科技有限公司 需要積�0
� � �人ELISA試劑�
【資料簡介�

基質金屬蛋白�9 (MMP-9)人ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使� 標本:血清或血�

試驗原理�
MMP-9試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA�.已知MMP-9濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MMP-9和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌人ELISA試劑盒去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MMP-9的濃度呈比例關系�
人ELISA試劑�自備材料
蒸餾水�
加樣器:5ul�10ul�50ul�100ul�200ul�500ul�1000ul�
振蕩器及磁力攪拌器等�
安全�
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗�
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品�
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份�
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存�
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質�
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用�
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器�
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品�
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水�
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值�
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣�
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作�
樣品收集、處理及保存方法
血�-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后�1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離�
血�-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測�1000×g離心30分鐘去除顆粒�
細胞上清�---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物�
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎�1000×g離心10分鐘,取上清�
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差�
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1�1稀釋后加入50ul于反應孔內�
加入稀釋好后的標準�50ul于反應孔、加入待測樣�50ul于反應孔內。立即加�50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻�37℃溫�1小時�
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次�
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫�30分鐘�
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次�
每孔加入底物A、B�50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫�10分鐘。避免光照�
取出酶標板,迅速加�50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果�
�450nm波長處測定各孔的OD值�
局�
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果�
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990�
2. 特異性:不與其它細胞因子反應�
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%�
� � � � � � �
1、儀器值:于波�450nm的酶標儀上讀取各孔的OD�
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y)人ELISA試劑盒相應的MMP-9標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的MMP-9含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度�
3、檢測值范圍:0-800ng/ml
4、敏感度� 1.0 ng/ml

Y139695 辛基三嗪酮相關物質C標準� 20mg 乙基己基三嗪酮相關物質C
Y139696 氟替卡松丙酸酯相關物質混合物標準� 25mg NA 
Y139697 氟替卡松丙酸酯鼻噴劑分離度用混合物標準品 25mg NA 
Y139698 醋酸戈那瑞林雜質標準� 10mg NA 
Y139699 重組蛋白A標準� ea NA 
Y139700 卡巴拉汀酒石酸鹽K-異構� 20mg NA 
Y139701 群勃龍醋酸酯系統適用性混合物 30mg NA 
Y139702 依諾肝素鈉溶液用于生物測定標準品 1ml NA
Y139703 胺碘酮相關物質E標準� Amiodarone Related Compound E 25mg Amiodarone R...
Y139704 尼泊金甲酯標準品 Methylparaben  125mg 99-76-3 
Y139705 丙戊酸相關物質A標準� 0�25ml 99-67-2 
Y139706 水楊酸相關物質A標準� 100mg 9-96-7 
Y139707 丙戊酸標準品 Valproic Acid  500mg 99-66-1 
Y139708 昂丹司瓊雜質D標準� 30mg 99614-64-9 
Y139709 昂丹司瓊標準� Ondansetron  300mg 99614-02-5 
Y139710 瑞格列奈相關物質B標準� 50mg 99469-99-5 
Y139711 鹽酸文拉法辛標準� Venlaine Hydrochloride  100mg 99300-78-4 
Y139712 酒石酸唑吡坦標準� Zolpidem Tartrate CIV 200mg 99294-93-6 
Y139713 堿式沒食子酸鉍標準品 Bismuth Subgallate (AS� 2g 99-26-3
Y139714 克拉霉素混合物R標準� 10mg 992-62-1
Y139715 紅霉素相關物質N標準� 50mg 992-62-1
Y139716 吡嗪酰胺標準� Pyrazinamide  200mg 98-96-4 
Y139717 �-�-表沒食子兒茶素沒食子酸酯標準� 20mg 989-51-5
Y139718 煙酰胺標準品 Niacinamide (Vitamin B3� 500mg 98-92-0 
Y139719 異丙苯標準品 Cumene 1.2ml×3ampules 98-82-8
Y139720 甲酚曲唑三硅氧烷相關物質B標準� 25mg 98809-58-6
Y139721 醋酸倍他米松標準� Betamethasone Acetate 500mg 987-24-6
Y139722 阿散酸標準品 Arsanilic Acid 25mg 98-50-0
Y139723 琥珀酸美托洛爾標準品 Metoprolol Succinate  200mg 98418-47-4 
Y139724 非那雄胺標準� Finasteride  200mg 98319-26-7 
Y139725 馬來酸溴苯那敏標準品 Brompheniramine Maleate 125mg 980-71-2
Y139726 S-腺苷-L-高半胱氨酸標準品 S-Adenosyl-L-Homocysteine 50mg 979-92-0
Y139727 泮托拉唑相關物質C標準� 人ELISA試劑� 20mg 97963-62-7 
Y139728 戊酸雌二醇標準品 Estradiol Valerate 100mg 979-32-8
Y139729 二硫化四乙基秋蘭姆標準品 Disulfiram 200mg 97-77-8
Y139730 螺內酯相關物質A標準� 100mg 976-71-6 
Y139731 尿囊素標準品 Allantoin 200mg 97-59-6
Y139732 芐星頭孢匹林標準� Cephapirin Benzathine 100mg 97468-37-6
Y139733 蒼白松果菊標準品 1g 97281-15-7
Y139734 托吡酯標準品 Topiramate  150mg 97240-79-4 
Y139735人ELISA試劑� 睪內酯酮標準� Testolactone CIII 125mg 968-93-4 

上海通蔚生物科技有限公司作�

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