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技術中�

水蛭素(HR)說明書

2013�11�28� 19:45:17人氣�830來源�上海蔚霆生物科技有限公司

資料類型doc文件資料大小57856
下載次數5資料圖片 【點擊查看�
� � �上海蔚霆生物科技有限公司 需要積�0
� � �水蛭�,(HR�,說明�
【資料簡介�

水蛭素(HR)基因蛋白聯免疫分析(ELISA�

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用�

藥品名稱�

通用名:水蛭素(HR)基因蛋白聯免疫分析試劑�

使用目的�

本試劑盒用于測定相關液體樣本中水蛭素(HR)含量�

實驗原理

本試劑盒應用間接法測定標本中水蛭素(HR)基因蛋白水平。用純化的水蛭素(HR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的水蛭素(HR)標準品和未知濃度的水蛭素(HR)待檢樣品,溫育后,加入*標記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,經�*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的水蛭素(HR)呈正相關。用酶標儀�450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中水蛭素(HR)濃度� 

試劑盒組� 

1

20倍濃縮洗滌液

50ml×1�

 

 

9

標準品S1�60ng/L�

0.5ml×1�

2

鏈霉親和�-HRP

6ml×1�

標準品S2�40ng/L�

0.5ml×1�

3

酶標包被�

12�×8�

標準品S3�20ng/L �

0.5ml×1�

4

*標記的抗-IgG抗體

6ml×1�

標準品S4�10ng/L �

0.5ml×1�

5

顯色劑A�

6ml×1�

標準品S5�5ng/L �

0.5ml×1�  

6

顯色劑B�

6ml×1/�

10

密封�

1�

7

終止�

6ml×1�

11

封板�

3�

8

樣品稀釋液

6ml×1�

12

說明�

1�

 

標本要求 

1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�

2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融

操作步驟

1. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔�

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。然后在標準品孔中加入標準品50μl,在樣本反應孔中先加入待測樣�10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品zui終稀釋度�5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫�45分鐘�

3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如此重�4次,拍干�

5. �*標記的抗-IgG抗體:每孔加�*標記的抗-IgG抗體50μl�37℃溫�30分鐘

6. 洗滌:操作同4�

7. 加鏈霉親和素-HRP:每孔加�50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫�30分鐘�

8. 洗滌:操作同4�

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.

10. 終止:每孔加終止�50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)� 測定應在加終止液�15分鐘以內進行�

 

計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度� 

注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存�

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣�

4� 如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品�*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數�×5×n)�

5� 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�

6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存�

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�

9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準�

線形范圍�

2ng/L -70ng/L 

規格�

96人份/�

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃�

2.有效期�6個月

上海逸晗生物科技有限公司代理不同品牌價格檔次的ELISA試劑盒。抗體產品等, 品種多,質量好,價格實惠,并且還提供免費代檢測服務�
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