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技術中�

小鼠促卵泡生成素(FSH)定量檢� ELISA kit

2013�01�05� 14:05:03人氣�351來源�上海裕平生物科技有限公司

資料類型doc文件資料大小54272
下載次數(shù)157資料圖片 【點擊查看�
� � �上海裕平生物科技有限公司 需要積�0
� � �上海裕平生物,酶聯(lián)免疫試劑�,48T/96T,美國
【資料簡介�

小鼠促卵泡生成素�FSH)定量檢測試劑盒�ELISA

使用說明�

                                                                                                                            

【試劑盒名稱�

小鼠促卵泡生成素�FSH)定量檢測試劑盒�ELISA

【試劑盒用途�

定量檢測小鼠血清、血漿及相關液體樣本�促卵泡生成素FSH)的含量�

【檢測原理�

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶�(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被小鼠促卵泡生成素FSH)抗體的透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底�AB,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中小鼠促卵泡生成素�FSH)濃度呈正相關,450nm波長下測�OD值,根據(jù)標準品和樣品�OD值,計算樣本中小鼠促卵泡生成素(FSH)含量�

【試劑盒組成�

1

酶標包被�

12×8

7

顯色�A

6mL

2

標準品:24mIU/mL

0.6mL

8

顯色�B

6mL

3

20倍濃縮洗滌液

25mL

9

終止�

6mL

4

標準品稀釋液

6mL

10

說明�

1

5

樣本稀釋液

6mL

11

封板�

2

6

酶標試劑

6mL

12

密封�

1

備注�標準品用標準品稀釋液依次稀釋為�2412631.50.75mIU/mL

 

【需要而未提供的試劑和器材�

137恒溫�

2�標準�(guī)格酶標儀

3�精密移液器及一次性吸�

4�蒸餾�

5�一次性試�

6�吸水�

【操作步驟�

1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平�30分鐘�

2、配液:用蒸餾水�20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液�

3、加標準品和待測樣本:取足夠�(shù)量的酶標包被板,固定于框架上�分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準�50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀�5倍);標準品和待測樣本孔均再加酶標工作液50μL;空白對照孔不加�

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機按說明書操作洗板)�

6、顯色:每孔先加入顯色劑A 50μL,再加入顯色�B 50μL37℃避光顯�15min

7、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)�

8、測定:以空白孔調零,在終止�15分鐘內,�450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)�

9、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本�OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)�

【樣本要求�

1、樣�不能含疊氮鈉(NaN3,因�疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑�

2�標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融�

3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒�

【注意事項�

1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀�(shù)為準�

2酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存�

3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差�

4、牢記樣本已�(jīng)稀�5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度�

5、本試劑盒定量范圍為0.75-24mIU/mL,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用標準品稀釋液稀釋后測定準確結果�0.75-24mIU/mL范圍內),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度�

6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間�

7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微�;不得重復使�封板�

8、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用�

9、底�B對光敏感,避免長時間暴露于光下�

 

【操作程序總結�

 

準備試劑,樣品和標準�

 


 

加入準備好的樣品和標準品�37℃反�30分鐘

 

洗板4次,加入酶標試劑�37℃反�30分鐘

 

洗板4次,加入顯色�AB37℃顯�15分鐘

 

加入終止�

 

15分鐘之內讀OD

 

計算

 

【檢測范圍�

0.75-24mIU/mL

【規(guī)格�

96人份/

【貯藏�

2-8℃,避光防潮保存�

【有效期�

6個月


   上海裕平生物科技有限公司主要�(jīng)營各種品牌檔次的ELISA試劑盒,*,售后服務完善。并提供免費代檢測。服務于高校及免疫學科研單位。技術人員更好的為您服務�
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