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技術中�

犬白細胞介素-1(IL-1)酶elisa試劑盒使用說明書

2012�08�14� 09:25:09人氣�242來源�研晶試劑供應網,專業試劑批發銷售

資料類型jpg文件資料大小7752
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� � �研晶試劑供應網,專業試劑批發銷售 需要積�0
� � �IL-1,白細胞介�-1,犬白細胞介素-1,犬白IL-1
【資料簡介�

犬白細胞介素-1IL-1)酶elisa試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用�
檢測范圍�                                                          96T
1pg/ml-40pg/ml
 
使用目的�
本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關液體樣本�白細胞介�-1IL-1含量
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本�犬白細胞介素-1IL-1水平。用純化�犬白細胞介素-1IL-1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介�-1IL-1),再與HRP標記�白細胞介�-1IL-1抗體結合,形成抗�-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中�白細胞介�-1IL-1呈正相關。用酶標儀�450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品�犬白細胞介素-1IL-1濃度�
試劑盒組�

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1�
7
終止�
6ml×1�
2
酶標試劑
6ml×1�
8
標準品(80pg/ml�
0.5ml×1�
3
酶標包被�
12�×8�
9
標準品稀釋液
1.5ml×1�
4
樣品稀釋液
6ml×1�
10
說明�
1�
5
顯色劑A�
6ml×1�
11
封板�
2� 
6
顯色劑B�
6ml×1/�
12
密封�
1�

犬白細胞介素-1IL-1)酶elisa試劑盒使用說明書
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�
操作步驟
1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋�

40pg/ml
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
20pg/ml
4號標準品
150μl�5號標準品加入150μl標準品稀釋液
10pg/ml
3號標準品
150μl�4號標準品加入150μl標準品稀釋液
5pg/ml
2號標準品
150μl�3號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5pg/ml
1號標準品
150μl�2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 
 
2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加�50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣�10μl(樣品zui終稀釋度�5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�
3.         溫育:用封板膜封板后�37℃溫�30分鐘�  
4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如此重�5次,拍干�
6.         加酶:每孔加入酶標試�50μl,空白孔除外�
7.         溫育:操作同3�
8.         洗滌:操作同5�
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.
10.     終止:每孔加終止�50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�
11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)� 測定應在加終止液�15分鐘以內進行�
操作程序總結�
 
計算
  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度�
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣�
4� 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品�*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數�×n×5)�
5� 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請避光保存�
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準�
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8
2.有效期�6個月
 

犬白細胞介素-1(IL-1)酶elisa試劑盒使用說明書

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