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96T大鼠唾液酸ELISA 檢測(cè)試劑�

2012�07�20� 12:03:56人氣�398�(lái)源:上海通蔚生物科技有限公司

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�(guān) � �大鼠唾液酸ELISA 檢測(cè)試劑�
【資料簡(jiǎn)介�

大鼠唾液酸ELISA 檢測(cè)試劑�

本試劑僅供研究使�  �(biāo)本:血清或血�

試驗(yàn)原理�
SA試劑盒是固相夾心法酶�(lián)免疫吸附�(shí)�(yàn)(ELISA�.已知SA濃度的標(biāo)�(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)�(jìn)行檢�(cè)。先將SA和生物素�(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素�(biāo)記過(guò)的HRP。再�(jīng)�(guò)溫育和洗�,去除未�(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏�。顏色的深淺和樣品中SA的濃度呈比例�(guān)��

自備材料
1� 蒸餾��
2� 加樣器:5ul�10ul�50ul�100ul�200�500ul�1000ul�
3� 振蕩器及磁力攪拌器等�

大鼠唾液酸ELISA 檢測(cè)試劑�

安全�
1� 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗�
2� �(shí)�(yàn)中不要吃�、抽煙或使用化妝品�
3� 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份�

操作注意事項(xiàng)
1� 試劑�(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)�(chǔ)�,使用前恢復(fù)到室�。稀稀�(guò)后的�(biāo)�(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保��
2� �(shí)�(yàn)中不用的板條�(yīng)立即放回包裝袋中,密封保�,以免變�(zhì)�
3� 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批�(hào)的試劑不要混�。保�(zhì)前使用�
4� 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器�
5� 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品�
6� 洗滌酶標(biāo)板時(shí)�(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶�(biāo)反應(yīng)孔中吸水�
7� 底物A�(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)�(shí)間打�(kāi)蓋子。底物B�(duì)光敏�,避免長(zhǎng)�(shí)間暴露于光下。避免用手接�,有�。實(shí)�(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD��
8� 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反�(yīng)板孔溫育的時(shí)間一��
9� 按照�(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的�(shí)�、加液的量及順序�(jìn)行溫育操��

大鼠唾液酸ELISA 檢測(cè)試劑�

樣品收集、處理及保存方法
1� 血�-----操作�(guò)程中避免任何�(xì)胞刺激。使用不含熱原和�(nèi)毒素的試�。收集血液后�1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離�
2� 血�-----EDTA、檸檬酸�、肝素血漿可用于檢測(cè)�1000×g離心30分鐘去除顆粒�
3� �(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物�
4� 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎�1000×g離心10分鐘,取上清�
5� 保存------如果樣品不立即使�,應(yīng)將其分成小部�-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢�(cè)前先離心或過(guò)�。不要在37℃或更高的溫度加熱解�。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�

試劑的準(zhǔn)�
1� �(biāo)�(zhǔn)品:�(biāo)�(zhǔn)品的系列稀�?xiě)?yīng)在實(shí)�(yàn)�(shí)�(zhǔn)�,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)�(zhǔn)品振蕩混�。稀釋比例按下表中�(jìn)行:
800 mg/L �6�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加�50ul�
400 mg/L �5�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
200 mg/L �4�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品) 100ul�5�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
100 mg/L �3�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品) 100ul�4�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
50 mg/L �2�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品) 100ul�3�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
25 mg/L �1�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品) 100ul�2�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
0 mg/L (空白對(duì)照) 原始濃度不用稀釋直接加�50ul�

2� 洗滌緩沖液(50×)的稀�?zhuān)赫麴s�50倍稀��


操作步驟
1� 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體�(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣�,產(chǎn)生加樣上的誤��
2� 根據(jù)待測(cè)樣品�(shù)量加上標(biāo)�(zhǔn)品的�(shù)量決定所需的板條數(shù)。每�(gè)�(biāo)�(zhǔn)品和空白孔建議做�(fù)�。每�(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)�,能使用�(fù)孔的盡量做復(fù)�。標(biāo)本用�(biāo)本稀釋液1�1稀釋后加入50ul于反�(yīng)孔內(nèi)�
3� 加入稀釋好后的�(biāo)�(zhǔn)�50ul于反�(yīng)�、加入待�(cè)樣品50ul于反�(yīng)孔內(nèi)。立即加�50ul的生物素�(biāo)記的抗體。蓋上膜�,輕輕振蕩混勻,37℃溫�1小時(shí)�
4� 甩去孔內(nèi)液體,每孔加�(mǎn)洗滌�,振�30�,甩去洗滌液,用吸水紙拍�。重�(fù)此操�3�。如果用洗板�(jī)洗滌,洗滌次�(shù)增加一次�
5� 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混��37℃溫�30分鐘�
6� 甩去孔內(nèi)液體,每孔加�(mǎn)洗滌�,振�30秒,甩去洗滌�,用吸水紙拍�。重�(fù)此操�3次。如果用洗板�(jī)洗滌,洗滌次�(shù)增加一��
7� 每孔加入底物A、B�50ul,輕輕振蕩混��37℃溫�10分鐘。避免光��
8� 取出酶標(biāo)�,迅速加�50ul終止�,加入終止液后應(yīng)立即�(cè)定結(jié)��
9� �450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值�

6�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品以上的�(jié)果為非線性的,根�(jù)此標(biāo)�(zhǔn)曲線�(wú)法得到的�(jié)��

大鼠唾液酸ELISA 檢測(cè)試劑�

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品。稀釋度的線�。樣品線性回歸與�(yù)期濃度相�(guān)系數(shù)R值為0.990�
2. 特異性:不與其它�(xì)胞因子反�(yīng)�
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系�(shù)均小�10%�

�(jié) � � � � � �
1、儀器值:于波�(zhǎng)450nm的酶�(biāo)儀上讀取各孔的OD�

2、以吸光度OD值為縱坐�(biāo)(Y�,相�(yīng)的SA�(biāo)�(zhǔn)品濃度為橫坐�(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲�,樣品的SA含量可根�(jù)其OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線換算出相�(yīng)的濃度�

3、檢�(cè)值范圍:0-800mg/L

4、敏感度� 1.0 mg/L
Ruthenium Red 釕紅 [11103-72-3] 100mg
Azure B 天青B [531-55-5] 25g
Azelaic acid 壬二� [123-99-9] 250g
Aflatoxin G1 黃曲霉毒素G1 [1165-39-5] 1mg
Aflatoxin G2 黃曲霉毒素G2 [7241-98-7] 1mg
Aflatoxin M1 from Aspergillus flavus 黃曲霉毒素M1 [6795-23-9] 1mg
Agarose ITM 瓊脂� ITM [9012-36-6] 25g
Allura red 誘惑� [25956-17-6] 100g
Ethyl red 乙基� [76058-33-8] 50g
BPDA �(lián)苯二� [2420-87-3] 100g
Agarose IIITM 瓊脂� IIITM [9012-36-6] 5g
Agarose IIITM 瓊脂� IIITM [9012-36-6] 25g
Agarose IVTM 瓊脂� IVTM [9012-36-6] 5g
BCA, disodium salt 2,2’-�(lián)喹啉-4,4’-二羧酸二� [979-88-4] 25g
Benzil �(lián)苯甲� [134-81-6] 25g
Agarose IVTM 瓊脂� IVTM [9012-36-6] 25g
Agarose B, Low EEO 瓊脂� [9012-36-6] 50g
Agarose B, Low EEO 瓊脂� [9012-36-6] 250g
Agarose H 瓊脂糖H [9012-36-6] 50g
Agarose H 瓊脂糖H [9012-36-6] 250g
Agarose, Low melting 低熔�(diǎn)瓊脂� [9012-36-6] 5g
Agarose, Low melting 低熔�(diǎn)瓊脂� [9012-36-6] 25g
Benzimidazole 苯并咪唑 [51-17-2] 25g
Benzopurpurine 4B 苯紅�4B [992-59-6] 25g
BAEE 苯甲�-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽 [2645-08-1] 1g
Alcian yellow 阿利新黃GXS() [61968-76-1] 50g
Ala-Gln 丙谷二肽 [39537-23-0] 1g
β-Alanine β-丙氨� [107-95-9] 100g
D-Alanine D-丙氨� [338-69-2] 100g
DL-Alanine DL-丙氨� [302-72-7] 500g
L-Alanine L-丙氨� [56-41-7] 100g
L-Alanine L-丙氨� [56-41-7] 500g
DL-Alaninol DL-氨基丙醇 [6168-72-5] 250ml
Albumin, from bovine Cohn fraction V pH 5.2 牛血清白蛋白 [9048-46-8] 50g
Albumin, from bovine pH 7.0 Fatty free �(wú)脂肪酸牛血清白蛋白 [9048-46-8] 50g
Albumin, from bovine Protease free �(wú)蛋白酶牛血清白蛋白 [9048-46-8] 50g
Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin 低內(nèi)毒素牛血清白蛋白 [9048-46-8] 50g
 

上海通蔚生物科技有限公司作�

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