上海莼試生物技術有限公�作�
魚組�(HIS)ELISA試劑盒說明書
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� � � | 上海莼試生物技術有限公� | 需要積� | 0 |
� � � | 魚組�(HIS)ELISA試劑�?,魚組�(HIS)ELISA試劑�?,魚組�(HIS)ELISA� |
- 【資料簡介�
魚組�(HIS)ELISA試劑�說明�
魚組�(HIS)ELISA試劑� 優勢�
1、進口抗體----高效、靈�、特異性好
2、規范包被操�----吸附均勻、吸附性好、空白值低、孔底透明度高
3、先進的優化方案----重復性高,可靠性強
4、高標準技術服務要求:靈敏度高,特異性強
5、適用范圍廣:血�、血�、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等多種類型的樣�
魚組�(HIS)ELISA試劑�檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA�。往預先包被組胺(HIS)抗體的包被微孔�,依次加入標�、標準品、HRP標記的檢測抗�,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍�,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺(HIS)呈正相�。用酶標儀�450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度�
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試�,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后�3000轉離�10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離�
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝�3000轉離�30分鐘取上��
3. 細胞上清液:3000轉離�10分鐘去除顆粒和聚合物�
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎�3000轉離�10分鐘取上��
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢�,請按一次用量分裝,凍存�-20�,避免反復凍�,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解��
自備物品
?酶標儀�450nm�
?高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL�2-20uL�20-200uL�200-1000uL
?37℃恒溫箱
魚組�(HIS)ELISA試劑�操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8�,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F�,水浴加熱使結晶*溶解后再使用�
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋�,密封(低溫干燥)保存�
3. 濃度�0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空�;按照說明書操作時樣本已經稀�5�,終結果乘以5才是樣本實際濃度�
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作�
5. 所有液體組分使用前充分搖勻�
試劑盒組�
名稱96孔配�48孔配�備注
微孔酶標�12孔�8�12孔�4��
標準�0.3mL*6�0.3mL*6��
樣本稀釋液6mL3mL�
檢測抗體-HRP10mL5mL�
20×洗滌緩沖�25mL15mL按說明書進行稀�
底物A6mL3mL�
底物B6mL3mL�
終止�6mL3mL�
封板�2�2��
說明�1�1��
自封�1�1��
注:標準品(S0-S5)濃度依次為�0�12.5�25�50�100�200 mg/L
魚組�(HIS)ELISA試劑�試劑的準�
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1�20稀�,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾��
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內液�,每孔加滿洗滌液,靜�1min后甩盡孔內液�,在吸水紙上拍干,如此洗�5��
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸�1min,洗�5次�
操作步驟
1. 從室溫平�20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放�4��
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準�50μL�
3. 樣本孔先加待測樣�10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加�
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔�37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min�
5. 棄去液體,吸水紙上拍�,每孔加滿洗滌液,靜�1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板��
6. 每孔加入底物A、B�50μL�37℃避光孵�15min�
7. 每孔加入終止�50μL�15min�,在450nm波長處測定各孔的OD��
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐�,對應OD值作縱坐�,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度��
試劑盒性能
? 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R�,大于等�0.9900�
? 靈敏度:低檢測濃度小�1.0 mg/L�
? 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應�
? 重復性:板內、板間變異系數均小于15%�
? 貯藏�2-8℃,避光防潮保存�
? 有效期:6個月
免責聲明
? 試劑盒僅供研究使�,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承�,本公司概不負責�
? 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔�
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