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技�(shù)中心

豬TH�(xì)胞酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

2021�06�17� 08:55:21人氣�593來源�上海紀(jì)寧實(shí)�(yè)有限公司

資料類型doc文件資料大小118784
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� � �上海紀(jì)寧實(shí)�(yè)有限公司 需要積�0
�(guān) � �豬TH�(xì)胞(TH)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
【資料簡介�

 豬TH�(xì)胞(TH)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用�

檢測范圍�96T
30ng/L -1600 ng/L

使用目的�
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本� TH�(xì)胞(TH)含量�

豬TH�(xì)胞(TH)酶�(lián)免疫分析試劑盒實(shí)�(yàn)原理
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中� TH�(xì)胞(TH�   。用純化的豬 TH�(xì)胞(TH�
抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 TH�(xì)胞(TH),再與   HRP
�(biāo)記的 TH�(xì)胞(TH)抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體�(fù)合物,經(jīng)�*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB � HRP  酶的催化下轉(zhuǎn)化成�(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的TH�(xì)胞(TH)呈正相�(guān)。用酶標(biāo)儀�  450nm波長下測定吸光度(OD值),通過�(biāo)�(zhǔn)曲線�(jì)算樣品中� TH�(xì)胞(TH)濃度�

試劑盒組�

�(biāo)本要
1.標(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取,提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行,提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能
馬上�(jìn)行試�(yàn),可將標(biāo)本放�-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,�   NaN3抑制辣根過(HRP)活性�

豬TH�(xì)胞(TH)酶�(lián)免疫分析試劑盒操作步�
1.  �(biāo)�(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)�(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中�(jìn)行稀
釋�

2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)�(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上�(biāo)�(zhǔn)品準(zhǔn)確加� 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣� 10µl(樣品終稀釋度� 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�

3.溫育:用封板膜封板后     37℃溫�30分鐘�

4.配液:將 30倍濃                  30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜30秒后棄去,如此重�(fù) 5次,拍干�
6.加酶:每孔加入酶�(biāo)試劑 50µl,空白孔除外�
7.溫育:操作同 3�
8.洗滌:操作同 5�
9.顯色:每孔先加入顯色� A50µl,再加入顯色� B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�
10分鐘.
10.終止:每孔加終止�    50µl,終止反�(yīng)(此�(shí)�(lán)色立�(zhuǎn))�
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)�(jìn)行�

操作程序總:

�(jì)�

以標(biāo)�(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)� OD值為縱坐�(biāo),在坐標(biāo)紙上,根�(jù)樣品的OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)�(zhǔn)物的濃度�  OD值計(jì)算出�(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品� OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的�(shí)際濃度�

豬TH�(xì)胞(TH)酶�(lián)免疫分析試劑盒注意事�(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出�(yīng)在室溫平� 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響�
3.各步加樣均�(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其�(zhǔn)確性,以避免試�(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好
控制� 5分鐘�(nèi),如�(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣�
4.請每次測定的同�(shí)做標(biāo)�(zhǔn)曲線,好做復(fù)孔。如�(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣�  OD�
大于�(biāo)�(zhǔn)品孔孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)
算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5)�
5.封板膜只限一次性使用,以避免交�
6.底物請避光保存。�
7.嚴(yán)格按照說明書的操作�(jìn)行,試驗(yàn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都�(yīng)按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�

保存條件及有效期
1.試劑盒保存�2-8℃�
2.有效期�6�(gè)�

上海紀(jì)寧實(shí)�(yè)有限公司作�

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