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技術中�

猴子α防御素(α-DF)酶聯免疫分析試劑盒使用說明�

2019�06�26� 09:04:17人氣�106來源�上海酶聯生物研究所

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� � �上海酶聯生物研究所 需要積�0
� � �猴子α防御素(α-DF)酶聯免疫分析試劑盒使用說明�
【資料簡介�

                            猴子α防御�(α-DF)酶聯免疫分析試劑�

本試劑盒僅供研究使用�

檢測范圍�96T

3.0pg/ml-80pg/ml

使用目的�

本試劑盒用于測定猴子血清、血漿及相關液體樣本�α防御�(α-DF)含量�

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴�α防御�(α-DF)水平。用純化的猴�α防御�(α-DF)抗體包被微孔�,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α防御�(α-DF),再與HRP標記�α防御�(α-DF)抗體結合,形成抗�-抗原-酶標抗體復合�,經�*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃�。顏色的深淺和樣品中�α防御�(α-DF)呈正相關。用酶標儀�450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴�α防御�(α-DF)濃度� 

試劑盒組� 

標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣�,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活��

猴子α防御�(α-DF)酶聯免疫分析試劑�操作步驟

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加�50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣�10μl(樣品終稀釋度�5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�

3.溫育:用封板膜封板后�37℃溫�30分鐘�   

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如此重�5次,拍干�

6.加酶:每孔加入酶標試�50μl,空白孔除外� 

7.溫育:操作同3�

8.洗滌:操作同5�

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.

10.終止:每孔加終止�50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色��

11.測定:以空白空調��450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)� 測定應在加終止液�15分鐘以內進行�

猴子α防御�(α-DF)酶聯免疫分析試劑�操作程序總結�

計算

  以標準物的濃度為橫坐�,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃�;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度� 

注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存�

2.濃洗滌液可能會有結晶析�,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確�,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多�*使用排槍加樣�

4.請每次測定的同時做標準曲線做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數�×n×5��

5.封板膜只限一次性使�,以避免交叉污染�

6.底物請避光保存�

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.

8.所有樣�,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�

9.本試劑不同批號組分不得混用�

保存條件及有效期

1.試劑盒保存�2-8��

2.有效期�6個月

上海酶聯生物研究所作�

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