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技術中�

大鼠膜聯蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)試劑盒使用說明書

2019�06�25� 10:52:31人氣�118來源�上海博湖生物科技有限公司

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� � �上海博湖生物科技有限公司 需要積�0
� � �大鼠膜聯蛋白,ANX-�,試劑盒使用說明書
【資料簡介�

 

                      大鼠膜聯蛋白�(ANX-�)試劑盒使用說明書 

 

 

              本試劑盒僅供研究使用� 

檢測范圍�

3µg/L -125µg/L

 本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)含量�

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)水平。用純化的大�

膜聯蛋白�(ANX-�)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入膜聯

蛋白�(ANX-�),再� HRP 標記的膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)抗體結合,形成抗�-抗原-酶標�

體復合物,經�*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB � HRP 酶的催化下轉化成藍色,并�

酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)呈正相關。用

酶標儀� 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中大鼠膜聯蛋白Ⅰ

(ANX-�)濃度�

試劑盒組�

 

1 30 倍濃縮洗滌液

 

20ml×1 �

 

7 終止�

 

6ml×1 �

 

2 酶標試劑

 

6ml×1 �

 

8 標準品(240µg/L� 0.5ml×1 �

 

3 酶標包被�

4 樣品稀釋液

5 顯色� A �

6 顯色� B �

標本要求

 

12 �×8 �

6ml×1 �

6ml×1 �

6ml×1/�

 

9 標準品稀釋液

10 說明�

11 封板�

12 密封�

 

1.5ml×1 �

1 �

2 �

1 �

 

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加� 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl�

然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度� 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡

量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�

3. 溫育:用封板膜封板后� 37℃溫� 30 分鐘�

4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30 秒后棄去,如�

重復 5 次,拍干�

6. 加酶:每孔加入酶標試� 50µl,空白孔除外�

7. 溫育:操作同 3�

8. 洗滌:操作同 5�

9. 顯色:每孔先加入顯色� A50µl,再加入顯色� B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�

15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止� 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�

11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)� 測定應在加終�

液后 15 分鐘以內進行�

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品�

OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出�準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數�

即為樣品的實際濃度�

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存�

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時�

控制� 5 分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣�

4� 請每次測定的同時做標準曲做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD �

大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計

算時請后乘以總稀釋倍數�×n×5)�

5� 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�

6.底物請避光保存�

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�. 

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�

9.本試劑不同批號組分不得混用�

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準�

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃�

2.有效期�6 個月

上海博湖生物科技有限公司作�

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