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大鼠膜聯蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)試劑盒使用說明書
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� � � | 大鼠膜聯蛋白,ANX-�,試劑盒使用說明書 |
- 【資料簡介�
大鼠膜聯蛋白�(ANX-�)試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用�
檢測范圍�
3µg/L -125µg/L
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)含量�
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)水平。用純化的大�
膜聯蛋白�(ANX-�)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入膜聯
蛋白�(ANX-�),再� HRP 標記的膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)抗體結合,形成抗�-抗原-酶標�
體復合物,經�*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB � HRP 酶的催化下轉化成藍色,并�
酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膜聯蛋白Ⅰ(ANX-�)呈正相關。用
酶標儀� 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中大鼠膜聯蛋白Ⅰ
(ANX-�)濃度�
試劑盒組�
1 30 倍濃縮洗滌液
20ml×1 �
7 終止�
6ml×1 �
2 酶標試劑
6ml×1 �
8 標準品(240µg/L� 0.5ml×1 �
3 酶標包被�
4 樣品稀釋液
5 顯色� A �
6 顯色� B �
標本要求
12 �×8 �
6ml×1 �
6ml×1 �
6ml×1/�
9 標準品稀釋液
10 說明�
11 封板�
12 密封�
1.5ml×1 �
1 �
2 �
1 �
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加� 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl�
然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度� 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�
3. 溫育:用封板膜封板后� 37℃溫� 30 分鐘�
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30 秒后棄去,如�
重復 5 次,拍干�
6. 加酶:每孔加入酶標試� 50µl,空白孔除外�
7. 溫育:操作同 3�
8. 洗滌:操作同 5�
9. 顯色:每孔先加入顯色� A50µl,再加入顯色� B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止� 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)� 測定應在加終�
液后 15 分鐘以內進行�
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品�
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出�準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數�
即為樣品的實際濃度�
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時�
控制� 5 分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣�
4� 請每次測定的同時做標準曲做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD �
大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請后乘以總稀釋倍數�×n×5)�
5� 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請避光保存�
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準�
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃�
2.有效期�6 個月
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