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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司作�
人戊肝IgG（HEV-IgG）elisa試劑盒說明書
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| �(guān) � � | 人戊肝IgG elisa試劑盒說明書,HEV-IgG elisa試劑盒說明書,HEV-IgG eli | ||
- 【資料簡介�
人戊肝IgG（HEV-IgG）elisa試劑盒說明書
本試劑僅供研究使� 目的：本試劑盒用于檢�(cè)人血�，血漿中戊肝IgG（HEV-IgG�水平，感染人的血液學(xué)診斷�
�(shí)�(yàn)原理�
本試劑盒�用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫��ELISA��(cè)��(biāo)��人戊�IgG（HEV-IgG�。用純化�抗原包被微孔�，制成固�抗原�可與樣品中戊�IgG（HEV-IgG�相結(jié)���(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP�(biāo)記的抗原�(jié)�，形成抗�-抗體-酶標(biāo)抗原�(fù)合物，經(jīng)�*洗滌��底物TMB顯色�TMB�HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成�(lán)�，并在酸的作用下�(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀�450nm波長下測(cè)定吸光度�OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人戊�IgG（HEV-IgG�的存在與��
試劑盒組��
試劑盒組�
48孔配�
96孔配�
保存
說明�
1�
1�
封板�
2片（48�
2片（96�
密封�
1�(gè)
1�(gè)
酶標(biāo)包被�
1×48
1×96
2-8℃保�
陰性對(duì)�
0.5ml×1�
0.5ml×1�
2-8℃保�
陽性對(duì)�
0.5ml×1�
0.5ml×1�
2-8℃保�
酶標(biāo)試劑
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
樣品稀釋液
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
顯色�A�
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
顯色�B�
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
終止�
3ml×1�
6ml×1�
2-8℃保�
濃縮洗滌�
�20ml×20倍）×1�
�20ml×30倍）×1�
2-8℃保�
樣本處理及要��
1. 血清：室溫血液自然凝�10-20分鐘，離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清，保存過程中如出�(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心�
2. 血漿：�(yīng)根據(jù)�(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混�10-20分鐘后，離心20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離��
3. 尿液：用無菌管收�，離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照�(shí)��
4. �(xì)胞培�(yǎng)上清：檢�(cè)分泌性的成份�(shí)，用無菌管收集。離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清。檢�(cè)�(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS�PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸�，細(xì)胞濃度達(dá)�100�/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出�(xì)胞內(nèi)成份。離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心�
5. 組織�(biāo)本：切割�(biāo)本后，稱取重�。加入一定量�PBS�PH7.4。用液氮迅速冷凍保�?zhèn)�?�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量�PBS�PH7.4�，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充�。離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備��
6. �(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提�，提取按相關(guān)文獻(xiàn)�(jìn)�，提取后�(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能馬上�(jìn)行試�(yàn)，可將標(biāo)本放�-20℃保�，但�(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣�，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的�HRP）活��
操作步驟�
1. 編號(hào)：將樣品�(duì)�(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)�(shè)陰性對(duì)�2孔�陽性對(duì)�2�、空白對(duì)�1孔（空白�(duì)照孔不加樣品及酶�(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在�、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)�、陽性對(duì)�50μl。然后在待測(cè)樣品�先加樣品稀釋液40μl，然后再加待�(cè)樣品10μl�加樣將樣品加于酶�(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁�輕輕晃動(dòng)混勻�
3. 溫育：用封板膜封板后�37℃溫�0分鐘�
4. 配液：將30�48T�20倍）倍濃縮洗滌液加蒸餾水�600ml后備�
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜�30秒后棄去，如此重�(fù)5次，拍干�
6. 加酶：每孔加入酶�(biāo)試劑50μl，空白孔除外�
7. 溫育：操作同3�
8. 洗滌：操作同5�
9. 顯色：每孔先加入顯色�A 50μl，再加入顯色�B 50μl，輕輕震蕩混��37℃避光顯�15分鐘
10. 終止：每孔加終止�50μl，終止反�(yīng)（此�(shí)�(lán)色立�(zhuǎn)黃色��
11. �(cè)定：以空白空�(diào)零，450nm波長依序�(cè)量各孔的吸光度（OD值）� �(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)�(jìn)��
�(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔平均�≥1.00; 陰性對(duì)照平均�≤0.10
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界�=陰性對(duì)照孔平均�+0.15
陰性判定：樣品OD�< 臨界值（CUT OFF）者為人戊�IgG（HEV-IgG�陰�
陽性判定：樣品OD�≥ 臨界值（CUT OFF）者為人戊�IgG（HEV-IgG�陽�
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書�(jìn)行，本試劑不同批�(hào)組分不得混用�
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出�(yīng)在室溫平�15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
3�濃洗滌液可能�(huì)��(jié)�析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助�，洗滌時(shí)不影響結(jié)果�
4� 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染�
5．底物請(qǐng)避光保存�
6．試�(yàn)�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測(cè)�(shí)，參考波長為630nm
7．所有樣�，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液�2M的硫�，使用時(shí)必須注意安全�
保存條件及有效期
1�試劑盒保存：�2-8��
2．有效期�6�(gè)�
以上文章�上海豐翔生物科技有限公司整理�(fā)布，上海豐翔生物科技有限公司專業(yè)銷售各種品牌�ELISA試劑�。服�(wù)于高校及免疫�(xué)科研單位�*，售后服�(wù)完善。并可以免費(fèi)代檢�(cè)，更好的為您服務(wù)�
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2024世環(huán)�(huì)【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展�
div6�3��2024世環(huán)�(huì)【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展】于上海丨國家會(huì)展中[詳細(xì)]
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