上海莼試生物技�(shù)有限公司作�
人N端前腦鈉肽(NT-proBNP)ELISA試劑盒試驗原�
資料類型 | jpg文件 | 資料大小 | 245655 |
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�(guān) � � | 人N端前腦鈉�,NT-proBNP,ELISA試劑� |
- 【資料簡介�
人N端前腦鈉肽(NT-proBNP)ELISA試劑�使用目的�
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中N端前腦鈉�(NT-proBNP)含量�
實驗原理
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人N端前腦鈉�(NT-proBNP)水平。用純化的人N端前腦鈉�(NT-proBNP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入N端前腦鈉�(NT-proBNP),再與HRP標記的N端前腦鈉�(NT-proBNP)抗體�(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體�(fù)合物,經(jīng)�*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下�(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N端前腦鈉�(NT-proBNP)呈正相關(guān)。用酶標儀�450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人N端前腦鈉�(NT-proBNP)濃度�
試劑盒組�
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1�
7
終止�
6ml×1�
2
酶標試劑
6ml×1�
8
標準品(160 ng/L�
0.5ml×1�
3
酶標包被�
12�×8�
9
標準品稀釋液
1.5ml×1�
4
樣品稀釋液
6ml×1�
10
說明�
1�
5
顯色劑A�
6ml×1�
11
封板�
2�
6
顯色劑B�
6ml×1/�
12
密封�
1�
人N端前腦鈉肽(NT-proBNP)ELISA試劑�標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后�(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�
操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋�
80 ng/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
40 ng/L
4號標準品
150μl�5號標準品加入150μl標準品稀釋液
20 ng/L
3號標準品
150μl�4號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 ng/L
2號標準品
150μl�3號標準品加入150μl標準品稀釋液
5 ng/L
1號標準品
150μl�2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加�50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣�10μl(樣品zui終稀釋度�5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�
溫育:用封板膜封板后�37℃溫�30分鐘�
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如此重�(fù)5次,拍干�
加酶:每孔加入酶標試�50μl,空白孔除外�
溫育:操作同3�
洗滌:操作同5�
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.
終止:每孔加終止�50μl,終止反�(yīng)(此時藍色立�(zhuǎn)黃色)�
人N端前腦鈉肽(NT-proBNP)ELISA試劑�測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)� 測定�(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行�
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