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技術中�

豚鼠白介�-4(IL-4)ELISA試劑盒使用說明書

2017�07�14� 16:29:04人氣�214來源�上海潤裕生物科技有限公司

資料類型pdf文件資料大小137882
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� � �上海潤裕生物科技有限公司 需要積�0
� � �豚鼠白介�-4試劑�,豚鼠白介�-4檢測試劑�,豚鼠測定試劑�,IL-4試劑�,豚鼠試劑�
【資料簡介�

豚鼠白介�-4(IL-4�ELISA試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用�

檢測范圍�96T

1.5ng/L-48ng/L

使用目的�

本試劑盒用于測定豚鼠血清、血漿及相關液體樣本中白介素-4(IL-4)含量�

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豚鼠白介素-4(IL-4)水平。用純化的豚鼠白�

�-4(IL-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介�-4(IL-4),

再與HRP標記的白介素-4(IL-4)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*�

滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui�

的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素-4(IL-4)呈正相關。用酶標儀�450nm波長下測�

吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豚鼠白介素-4(IL-4)濃度�

豚鼠白介�-4(IL-4�ELISA試劑�組成

130倍濃縮洗滌液20ml×1�7終止�6ml×1�

2酶標試劑6ml×1�8標準品(96ng/L�0.5ml×1�

3酶標包被�12�×8�9標準品稀釋液1.5ml×1�

4樣品稀釋液6ml×1�10說明�1�

5顯色劑A�6ml×1�11封板�2�

6顯色劑B�6ml×1/�12密封�1�

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�

豚鼠白介�-4(IL-4�ELISA試劑�操作步驟

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀

釋�

48ng/L5號標準品150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液

24ng/L4號標準品150µl�5號標準品加入150µl標準品稀釋液

12ng/L3號標準品150µl�4號標準品加入150µl標準品稀釋液

6ng/L2號標準品150µl�3號標準品加入150µl標準品稀釋液

3ng/L1號標準品150µl�2號標準品加入150µl標準品稀釋液

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔�

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加�50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl�

然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度�5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡

量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�

3.溫育:用封板膜封板后�37℃溫�30分鐘�

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如�

重復5次,拍干�

6.加酶:每孔加入酶標試�50µl,空白孔除外�

7.溫育:操作同3�

8.洗滌:操作同5�

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�

15分鐘.

10.終止:每孔加終止�50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�

11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止

液后15分鐘以內進行�

操作程序總結�

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品�

OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出�

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數�

即為樣品的實際濃度�

豚鼠白介�-4(IL-4�ELISA試劑�注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存�

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時�

控制�5分鐘內,如標本數量多�*使用排槍加樣�

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD�

大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計

算時請zui后乘以總稀釋倍數�×n×5)�

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�

6.底物請避光保存�

7.嚴格按�豚鼠白介�-4(IL-4�ELISA試劑�說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�

9.本試劑不同批號組分不得混用�

10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準�

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃�

2.有效期�6個月

 

上海潤裕生物科技有限公司作�

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