微衛星(microsalite analysis)即短串聯重復序列(Short tandem repeat,STR),它是由2-6bp重復單位構成的DNA序列,通常擴增獲得的多態性長度片段范圍在100-400bp之間。STR基因座廣泛地存在于哺乳動物基因組中,以人類基因組為例,平均每15-20kb就存在1個STR座位,據此估計整個人類基因組中大約有50,000-100,000個STR位點。由于STR位點具有高度的多態性和穩定的遺傳性,因此較適合于作為遺傳學DNA分子標記,目前STR分析已廣泛應用于遺傳制圖、性狀連鎖性分析、親子鑒定、疾病基因定位和物種多態性研究等諸多領域。
多重引物PCR擴增
1985年,Mullis發明了聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR), 使DNA的體外復制變成了現實。1988年,Saiki 等將耐熱DNA聚合酶引入PCR,提高了擴增反應的特異性和效率,簡化了操作程序,并實現了DNA擴增的自動化,迅速的推動了PCR技術的應用和普及。PCR能夠在體外快速、特異性的擴增靶DNA,已成為當今zui重要的分子生物學技術之一。法醫物證應用PCR技術擴增人類基因組DNA中高度多態性位點,擴增產物經過片段長度多態性分析或序列多態性分析研究不同個體間DNA分子水平上的差異及其遺傳規律,在個人識別、親子鑒定中發揮了重要作用。 多重引物PCR擴增
但如何實現在一個反應管中多個STR位點同時均一穩定的擴增,卻一直是科研界的一個難題。中德生物經過長時間的研究,通過對目標靶基因區域的選擇,引物設計的優化,電子PCR,多重侯選引物的軟件分析,反應參數的優化等方法,zui終建立了穩定的多重STR-pcr擴增技術平臺,并在此技術平臺基礎上開發了“STR銀染基因分型擴增試劑盒”,“STR熒光基因分型擴增試劑盒”“寵物犬STR銀染基因分型擴增試劑盒”產品。同時在此技術平臺基礎上正在開發食品安全領域的相關檢測試劑盒,如飼料中牛、羊、豬肉組織成分檢測系統。