人堿性磷酸酶（ALP）ELISA試劑盒使用說明書

Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置

標準品稀釋液：1.5ml×1瓶

酶標試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）

【人堿性磷酸酶（ALP）ELISA試劑盒 】本試劑僅供研究使用

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

試劑盒組成：

封板膜:2片（48）/2片（96）

說明書:1份

密封袋:1個

標準品：   2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶  2-8℃保存

酶標包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶  6 ml×1瓶     2-8℃保存

顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存

顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存

終止液:     3ml×1瓶 6ml×1瓶     2-8℃保存

濃縮洗滌液:（20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶   2-8℃保存

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人碳酸酐酶2（CA-2）水平。用純化的人碳酸酐酶2（CA-2）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A），再與HRP標記的抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人碳酸酐酶2（CA-2）濃度。

目的：本試劑盒用于測人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）的含量。

服務承諾：

供貨期：款到發(fā)貨。
工作時間內(nèi)免費的技術(shù)咨詢和指導 。請
為客戶提供來樣檢測服務，zui大限度實驗結(jié)果的有效性（免費代測）。

保存條件及有效期：

試劑盒保存：2-8℃| 有效期：6個月

【人堿性磷酸酶（ALP）ELISA試劑盒 】樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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