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轉(zhuǎn)基因品系棉花MON15985 PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)方法步驟

閱讀:968      發(fā)布時(shí)間:2022-8-31
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轉(zhuǎn)基因品系棉花MON15985 PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

血平板 (成品培養(yǎng)基)規(guī)格: 20個/盒作用: 用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)

哥倫比亞血平板(成品培養(yǎng)基)規(guī)格: 20個/盒作用: 用于一般病原菌的分離培養(yǎng)和溶血性細(xì)菌的鑒別

改良克氏雙糖培養(yǎng)基規(guī)格: 250g作用: 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的鑒定

硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基規(guī)格: 250g作用: 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)

半固體瓊脂規(guī)格: 250g作用: 供細(xì)菌動力觀察、菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等。(美國FDA、SN、GB)

3%氯化鈉三糖鐵瓊脂規(guī)格: 250g作用: 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)。(GB、SN)

血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格: 250g作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)

尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格: 250g作用: 用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn)

緩沖動力-硝酸鹽培養(yǎng)基規(guī)格: 250g作用: 供產(chǎn)氣莢膜梭菌動力和硝酸鹽還原測定用

動力—硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)規(guī)格: 250g作用: 供鑒別測定細(xì)菌液化明膠用

明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠)規(guī)格: 100g作用: 供測定細(xì)菌液化明膠使用

克氏雙糖鐵瓊脂規(guī)格: 250g作用: 用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖,及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。(ISO)

緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)規(guī)格: 250g作用: 用于MR和VP試驗(yàn)

Koser氏枸椽酸鹽肉湯規(guī)格: 100g作用: 用于細(xì)菌的枸櫞酸鹽的試驗(yàn)

西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基規(guī)格: 100g作用: 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)



 



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