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技術文章

液相色譜儀的使用維護及故障排除及解決方案

閱讀:7          發布時間:2025-1-16
【中國儀器網 維修保養】液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。    一、泵的使用和維護    1、防止固體微粒進入泵內。因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞桿、密封環、缸體和單向閥。泵的入口都應連接砂濾棒,輸液棒的濾器經常清洗或更換。    2、流動相不應含有任何腐蝕性物質。例如氯仿、丙酮、二氯甲烷等,這些溶劑將會Peek樹脂部件變脆;還有含有鹵離子的流動相或能產生鹵離子的流動相,如果使用了,分析結束后,應立即用去離子水清洗整個管路,因鹵離子會腐蝕不銹鋼部件或管路。流動相含有緩沖鹽不應停泵保留在泵內時間過長,由于蒸發甚至由于溶液的凈置就可能析出晶體。    3、泵工作時要注意流動相不要被用完,否則空泵運轉會加快磨損柱塞桿和密封圈。的壓力不要太高,否則會使密封圈變形,降低密封圈使用壽命。    4、在使用雙泵過程中,如果不是梯度洗脫,盡量先混合。如果一個是有機溶劑,一個是含鹽溶液,在用雙泵的時候,有可能會析出晶體。    5、在使用緩沖鹽作流動相實驗結束之前和結束后,都要用含10%甲醇水溶液沖洗管路,不能用純水沖洗,因純水會對柱子造成損壞。進樣閥要用適宜的溶劑進行清洗。    二、色譜柱的使用和維護    1、避免壓力和溫度的急劇變化以及機械震動。在進樣的時候,進樣閥扳手不能轉動太慢,更不能停留在中間,如停留在中間,泵內壓力劇增,這時再轉動到進樣位置時,過高的壓力會損壞色譜柱。如出現機械震動(掉在地上)則會改變填料的充填狀態。    2、在使用色譜柱過程中,不應直接從有機溶劑到水,反之,也不要從水直接改變到有機溶劑。    3、色譜柱一般不能反沖,除非生產者指明。    4、沖洗色譜柱時,每種溶劑至少沖洗50ml。    5、裝在機子上的色譜柱,應每隔4~5天沖洗15分鐘,可以避免長菌,保護色譜柱。    6、PH的調節盡量在2~9之間    7、保存色譜柱時,柱接頭要擰緊。    三、產生故障及排除方法    1、沒有流動相流出,又無壓力顯示。原因可能是泵內有大量氣體,這時打開排液閥,使泵在較大流量下運轉,將氣體排出,也可用一個針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個原因使密封圈損壞。    2、壓力和流量不穩。原因①可能有氣泡;②單向閥污染,可卸下單向閥,浸入異丙醇內超聲清洗;③沙濾棒內有雜質或微生物堵塞,可將沙濾棒浸入流動相中超聲清洗,也可將濾頭放入4mol/l硝酸溶液中,迅速除去微生物。也可能是鹽堵塞,可放入水中清洗;④在線過濾器堵塞⑤進樣閥損壞;⑥密封圈性能不好。    3、壓力過高。①管路堵塞;②保護柱堵塞;③檢測池堵塞,發生情況立即停泵,否則會損壞流通池。    四、與檢測器有關的故障及其排除    1、流通池內有氣泡。如果有氣泡連續不斷通過檢測池,將其噪音增大。如有較大氣泡,則會在基線上出現許多線狀“峰”,可加大流量排出氣體。如果檢測池有停留的氣泡,可采用突然增大流量的方法排除氣體(不連接色譜柱)。    2、檢測池被污染。檢測池被污染了,可能產生噪音,或基線漂移,可以使用適當溶劑清洗,如果污染嚴重,就可以用1mol/l硝酸溶液、水和新鮮溶劑進行清洗。    3、光源燈出現故障。檢測器的光遠燈不能滿足正常樣品分析時,可能產生嚴重噪音污染,基線漂移,出現異常峰,甚至基線不回零。    4、出現倒峰。如果流動相有紫外吸收的雜質,使用紫外檢測器時,就會產生倒峰,必須用高純度的溶劑作為流動相。檢測器的極性接反了,也會出現倒峰。 液相色譜故障處理

  液相色譜儀利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。一般問題主要有以下幾種;

  氣泡溢出

  流動相內有氣泡,關閉泵,打開泄壓閥,打開purg鍵,清洗脫氣,氣泡不斷從過濾器冒出,進入流動相,無論打開purge鍵幾次,都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,過濾器內部由于霉菌的生長繁殖,形成菌團,阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時,輕輕震蕩幾次,再將過濾器用純水清洗幾次,打開泄壓閥,打開purge鍵清洗脫氣,如仍有氣泡不斷從過濾器冒出,繼續將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出,說明過濾器內部的霉菌菌團已被硝酸破壞,流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,打開泵,流速調至1.0~3.0ml/min,純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗干凈。關閉泄壓閥,純甲醇沖洗半小時即可。

  柱壓高

  ⑴緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內;

  ⑵樣品污染沉積。

  處理對于種情況先用40~50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對于第二種情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子,再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

  無指示

液相色譜儀的使用維護及故障排除及解決方案(圖1)

  ⑴泵密封墊圈磨損;

  ⑵大量氣泡進入泵體。

  處理對于種情況,更換密封墊圈;對于第二種情況,在泵作用的同時,用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

  不穩定

  原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量,保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,避免吸入空氣,流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

  峰分叉

  ⑴色譜柱被污染;

  ⑵柱頭填料塌陷。

  處理對于種情況,先用純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。對于第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反復幾次,直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30分鐘以上。

  重復性差

  ⑴進樣閥漏液;

  ⑵加樣針不到位;

  ⑶液量不足。

  處理對于種情況更換進樣閥墊圈;對于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態轉換到INJECT狀態,以保證進樣量的準確。日常工作中,液相色譜儀的保養非常重要,注意不要讓空氣進入輸液系統和高壓泵中,儲液器內的溶液如長時間未用應清洗儲液器并更換溶液,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,防止無機鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質,溶解,盡量減少對色譜柱的污染,以延長色譜柱的使用壽命,同時避免注射過濃的樣品溶液,以免殘留液在進樣閥內析出固體引起堵塞;色譜柱作好標記,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。


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