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進口elisa試劑盒技術和WESTERN的不同?

時間:2018-3-2閱讀:278
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進口elisa試劑盒利用抗原抗體之間專一性鍵結之特性,對檢體進行檢測;由于結合于固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計其鍵結機制后,配合酵素呈色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用呈色之深淺進行定量分析。根據(jù)待測樣品與鍵結機制的不同,ELISA可設計出各種不同類型的檢測方式,主要以三明治法(sandwich)、間接法(indirect)、以及競爭法(Competitive)三種為主。
Western blot
    是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法,也是*的方法之一。
    利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的信息,來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。
    Western Blot與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。
免疫學三大工具,免疫組化、Western、ELISA,分別用于定位,定性和定量,各有各的功能。
 Western用于測分子量,ELISA用于測濃度。
    他們在測量前都要一個尺子(標準),但Western的尺子上標的是分子量(KD),ELISA的尺子上標的是濃度。
   Western用的是蛋白MARKER(已知大小的幾條蛋白),與蛋白一起電泳(不同泳道),實驗結束后知道目標蛋白的大小。
進口elisa試劑盒用的是標準品(已知濃度的蛋白,自己稀釋成不同濃度),與未知相本一起反應(不同孔),實驗結束后判斷目標蛋白的濃度。
    至于他們的后期原理,都是用抗體與目標蛋白反應,再加一個HRP標記的二抗,HRP可以讓DAB顯色(Western是DAB或者ECL發(fā)光,在膜上顯色,而ELISA用TMB顯色,顏色在孔里面,)
   當然,實際操作也沒這么簡單,但后期利用的原理是相當?shù)摹?br />沙美特羅相關物質A標準品    10mg
*相關物質B標準品    10mg
*相關物質A標準品    10mg
齊拉西酮相關物質D標準品    10mg
齊拉西酮相關物質C標準品    10mg
*相關物質G標準品    10mg
*相關物質D標準品    10mg
*相關物質B標準品    10mg
洛匹那韋系統(tǒng)適配物標準品    10mg
膦甲酸相關物質B標準品    10mg
*系統(tǒng)適用性用混合物標準品    10mg
*相關物質C標準品    10mg
*溶液混合物B標準品    10mg
*溶液混合物A標準品    10mg
*雜質C標準品    10mg
進口elisa試劑盒

 

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