大鼠elisa檢測試劑盒實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合elisa試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4.每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
6.依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.大鼠elisa檢測試劑盒依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進行檢測。
Medroxyprogesterone Acetate    YSRIBIO756    71-58-9     200mg    *標準品
Medrysone    YSRIBIO755    2668-66-8     500mg    甲羥松標準品
Mefenamic Acid     YSRIBIO754    61-68-7     200mg    **標準品
Mefloquine Hydrochloride     YSRIBIO753    51773-92-3     100mg    鹽酸*標準品
Mefloquine Related Compound A    YSRIBIO752        20mg    *相關物質A標準品
Megestrol Acetate     YSRIBIO751    595-33-5     500mg    *標準品
Meglumine (AS)    YSRIBIO750    6284-40-8     500mg    *標準品
Melatonin     YSRIBIO749    73-31-4     100mg    褪黑素標準品
Melengestrol Acetate     YSRIBIO748    2919-66-6     125mg    美侖孕酮醋酸酯標準品
大鼠elisa檢測試劑盒