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豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-Α)ELISA試劑盒說明

時間:2015-1-19閱讀:453
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豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-Α)ELISA試劑盒說明

本試劑盒僅供研究使用

檢測值范圍: 0-600pg/ml

敏感度:1.0pg/ml

試驗原理:豚鼠腫瘤壞死因子TNF-Α試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)已知TNF-Α濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TNF-Α和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中TNF-Α的濃度呈比例關系。

操作注意事項:試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

安全性:避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

豚鼠腫瘤壞死因子TNF-Α試劑盒性能:

1.靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2.特異性:不與其它細胞因子反應。

3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。 

結果判斷分析:儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值,以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TNF-Α標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TNF-Α含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。 

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