兔白細胞介素-8（IL-8）操作步驟

時間：2012-7-26閱讀：485

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兔白細胞介素-8（IL-8）操作步驟

操作步驟

1．取出酶標板，設空白孔，依照次序?qū)謩e加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫(yī)用蒸餾水替代）

2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。

3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘；

兔白細胞介素-8

4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體;

5、每個孔中加滿應用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。

6、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。

7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

兔白細胞介素-88、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。

9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體。

10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。

11、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。

12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）

13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。

14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。

15、在酶標儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。

兔白細胞介素-816、根據(jù)制備的標準曲線，計算樣本含量

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