二苯胺法測定DNA實驗方法

時間：2017/5/16閱讀：1579

大鼠elisa檢測試劑盒在濃氯化鈉（1―2mol/L）溶液中，脫氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化鈉（0.14 mol/L）溶液中，脫氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同濃度的氯化鈉溶液，將脫氧核糖核蛋白和核糖核蛋白從樣品中分別抽提出來。
將抽提得的核蛋白用SDS（十二烷基硫酸鈉）處理，DNA或（RNA）即與蛋白質(zhì)分開，可用―異戊醇將蛋白質(zhì)沉淀除去，而DNA則溶解于溶液中。向溶液中加入適量乙醇，DNA即析出。為了防止DNA或（RNA）酶解，提取時加入EDTA（乙二胺四乙酸）
大鼠elisa檢測試劑盒實驗材料與儀器：
1、小白鼠肝臟
2、勻漿器
3、離心機5000r/min
4、量筒50ml（×1），25 ml（×1），10 ml（×1）
5、吸管5 ml（×2）
6、水浴鍋
7、真空干燥器
實驗試劑：
1．5 mol/L NaCl 溶液：將292.3g NaCl 溶于水，稀釋至1000ml。
2．0.14mol/L NaCl―0.15mol/L EDTA―Na 溶液：溶8.18g NaCL 及37.2g EDTA―Na 于蒸餾水，稀釋至1000ml。
3．25% SDS 溶液：溶25g 十二烷基硫酸鈉于100ml 45% 乙醇
4．0.015 mol/L NaCL―0.0015 mol/L 檸檬酸三鈉溶：氯化鈉 0.828 g及檸檬酸三鈉0.341g 溶于蒸餾水，稀釋至1000ml。
5．1.5 mol/L NaCL―0.15 mol/L檸檬酸三鈉溶：氯化鈉 82.8 g 及檸檬酸三鈉34.1 g溶于蒸餾水，稀釋至1000ml。
6．3 mol/L乙醇鈉―0.001 mol/L EDTA―Na溶液：稱取乙酸鈉 408 g，EDTA―Na 0.372g 溶于蒸餾水，稀釋至1000ml。
7．70%乙醇，80%乙醇，95%乙醇，無水乙醇。
8．二苯胺試劑
9．1 mol/L過氯酸溶液：大鼠elisa檢測試劑盒將10ml過氯酸（70%）用蒸餾水稀釋至110ml。

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