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植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)elisa試劑盒使用方法

時間:2020-7-24閱讀:110
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植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)elisa試劑盒說明書

本試劑盒僅供研究使用

實驗原理
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 

2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒組成注意事項

1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品。

10. 實驗還需要酶標儀(450nm),37℃恒溫箱,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水。

11. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

13. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

14.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能人上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

15.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒產品優勢

1. 品種齊全、質量可靠、靈敏度高、特異性強、重復性好、操作簡便、穩定性好。

2. 同城(上海)需要代測可免費上門取樣,享免費送貨。

3. 訂購ELISA試劑盒可提供免費代測服務。

4. 現貨直發,順豐速運,全國包郵 。

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