賽多利斯超濾離心管

超濾
超濾是通過超濾膜實現的；這種膜具有方向異性，表現為表層致密，深層疏松的特點；根據超濾膜本身的孔徑，可以分離相應的大分子和溶劑。在超濾的過程中，溶劑和鹽類透過超濾膜，而大分子則因為被截留而得到濃縮。并且超濾還可以用來進行溶劑置換。通過多次的濃縮和添加目標溶劑，就可以逐步完成目標溶劑的替換，從而取代了冗長的透析步驟。盡管超濾并非分離/分餾不同大分子的標準方法，但在某些情況下仍可以運用，如不同大分子的分子量相差至少10倍以上。
超濾是一種溫和的方法，不會引起大分子的變性，因此比其他的方法更加有效，適應面更廣。
超濾的方法：
賽多利斯提供了各種各樣的超濾方法，供您在濃縮生物學樣品時使用。下面列舉了超濾產品的選型指南，您可以結合樣品體積，可用的設備，以及期望的超濾速度和過程控制等因素來選擇適合的產品
 

－離心濃縮：
（處理體積：100ul-100ml）
過膜壓力由離心力提供，在離心力的作用下，溶劑和小分子的物質將通過超濾膜，進入下游濾出液收集器中。這是一個溫和的過程，可快速裝配，并且比多數其他方法實現更快的過濾速度。
賽多利斯提供了多種產品，包括7種vivaspin®系列產品，2種vivacell®產品和1種centroSart®I,這些產品可用于蛋白濃縮，同時也有vivacon®系列產品用于DNA濃縮和多肽的濃縮與分離。
 

－加壓超濾
（處理體積：5ml-250ml）
過膜壓力過膜壓力由壓縮空氣或壓縮惰性氣體提供。為了得到快的超濾效果，加壓后的vivacell®產品可以放置在實驗室搖床上。搖床的震蕩，避免了大分子沉積在膜表面形成的濃差極化現象，從而維持了超濾流速。Vivaspin®20,Vivacell® 70, Vivacell® 100 and Vivacell® 250這四種產品可以帶
壓使用。
加壓離心是賽多利斯*的超濾方式，該方式集合了加壓超濾和離心超濾的優點，因此超濾的速度在所有方法中快。
通常，該方法比離心的方法要快30%-50%。Vivaspin®20和Vivacell®70可以進行加壓離心的操作（初始體積：5-50ml）。
 

－切向流
（處理體積：100ml-5L）
在蠕動泵的作用下，樣品流經超濾膜，又回流到樣品容器中；在切向流設備的回流出口位置安裝限流裝置，以此提高超濾膜表面受到的壓力；此時，超濾膜受到的切向壓力就是過膜壓力。在過膜壓力的作用下，溶劑和小分子的物質穿過超濾膜進入到濾出液收集容器中。可重復使用的Vivaflow® 50R和
Vivaflow®200以及一次性使用的Vivaflow®50，是目前市面上專門為實驗室應用而設計開發的切向流超濾膜包。

－靜態吸附
（初始體積：3ml-20ml）
這種技術，是在超濾膜的后方填充強吸附性的纖維素，在這些纖維素的吸附作用下，溶劑和小分子的物質透過超濾膜被吸收，從而使被截留的大分子得到濃縮，并集中在了樣品池的底部；在這里，纖維素的吸附力提供了過膜壓力。這種方法不需要任何其他的設備，因此是臨床應用的理想選擇，例
如，在進一步分析之前，對尿液進行濃縮。靜態吸附的產品有Vivapore®5和and Vivapore®20可供選擇。

超濾的典型應用

• －濃縮/脫鹽、適用于蛋白、酶類、DNA、單克隆抗體、免疫球蛋白、病毒和納米顆粒
• －在毛細管電泳之前，對尿液中本周氏蛋白(Bence Jones Protein，BJP)進行濃縮
• －司法鑒定中，在鏈式反應之前，對DNA進行濃縮
• －基于濾膜的樣品制備(filter-based sample preparation,FASP)-多肽的分離
• －游離型藥物/激素的分析
• －從PCR擴增后的DNA中去除引物；
• －去除標記氨基酸和標記核苷酸
• －去除樣品中的蛋白質
• －實驗室常規的濃縮和脫鹽、包括蛋白、酶類、DNA、生物分子、病毒、抗體和免疫球蛋白

Process Optimization
超濾過程的優化
某些情況下，必須追求zui高的回收率，例如，目標溶質處于微克級別，賽多利斯推薦您考慮如下措施來獲得*的超濾效果：

• －根據目標分子量，選擇盡量低的MWCO。為得到zui高的回收率，MWCO應至少在目標溶質分子量的一半以下；
• －避免過度濃縮。終體積越小，就越難以達到*的回收率。如果可行，在初濃縮之后，使用一滴或數滴緩沖液沖洗濃縮裝置，再進行回收；
• -對超濾裝置進行預處理；使用蒸餾水配制鈍化溶液，例如5%的SDS,Tween 20 或Triton X,將超濾裝置浸泡過夜，使用前*清洗即可使用。